1 范圍

本標準規定了實(shí)驗動(dòng)物90天經(jīng)口毒性試驗的基本試驗方法和技術(shù)要求。

本標準適用于評價(jià)受試物的亞慢性毒性作用。

2 術(shù)語(yǔ)和定義

2.1 亞慢性毒性

實(shí)驗動(dòng)物在不超過(guò)其壽命期限10%的時(shí)間內(大鼠通常為90d),重復經(jīng)口接觸受試物后引起的健康損害效應。

2.2 未觀(guān)察到有害作用劑量

通過(guò)動(dòng)物試驗，以現有的技術(shù)手段和檢測指標未觀(guān)察到任何與受試物有關(guān)的毒性作用的*大劑量。

2.3 *小觀(guān)察到有害作用劑量

在規定的條件下,受試物引起實(shí)驗動(dòng)物組織形態(tài)、功能、生長(cháng)發(fā)育等有害效應的*小作用劑量。

2.4 靶器官

實(shí)驗動(dòng)物出現由受試物引起明顯毒性作用的器官。

2.5 衛星組

在毒性研究設計和實(shí)施中外加的動(dòng)物組,其處理和飼養條件與主要研究的動(dòng)物相似,用于試驗中期或試驗結束恢復期觀(guān)察和檢測，也可用于不包括在主要研究?jì)鹊钠渌笜思皡档挠^(guān)察和檢測。

3 試驗目的和原理

確定在90d內經(jīng)口重復接觸受試物引起的毒性效應，了解受試物劑量-反應關(guān)系、毒作用靶器官和可逆性,得出90d經(jīng)口*小觀(guān)察到有害作用劑量(LOAEL)和未觀(guān)察到有害作用劑量(NOAEL),初步確定受試物的經(jīng)口安全性,并為慢性毒性試驗劑量、觀(guān)察指標、毒性終點(diǎn)的選擇以及獲得“暫定的人體健康指導值”提供依據。

4 儀器和試劑

4.1 儀器/器械

實(shí)驗室常用解剖器械、電子天平、生物顯微鏡、檢眼鏡、血生化分析儀、血液分析儀、凝血分析儀、尿液分析儀、心電圖掃描儀、離心機、病理切片機等。

4.2 試劑

甲醛、二甲苯、乙醇、蘇木素、伊紅、石蠟、血球分析儀稀釋劑、血生化分析試劑、凝血分析試劑、尿液分析試劑(或試紙)等。

5 試驗方法

5.1 受試物

受試物應使用原始樣品，若不能使用原始樣品，應按照受試物處理原則對受試物進(jìn)行適當處理。將受試物摻入飼料、飲用水或灌胃給予。

5.2 實(shí)驗動(dòng)物

5.2.1 動(dòng)物選擇

實(shí)驗動(dòng)物的選擇應符合GB14922.1和GB14922.2的有關(guān)規定。選擇已有資料證明對受試物敏感的動(dòng)物物種和品系，一般嚙齒類(lèi)動(dòng)物**大鼠,非嚙齒類(lèi)動(dòng)物**犬(通常選用BeagIe 犬)。大鼠周齡推薦不超過(guò)6周，體重50g~100g。試驗開(kāi)始時(shí)每個(gè)性別動(dòng)物體重差異不應超過(guò)平均體重的±20%,每組動(dòng)物數不少于20只,雌雄各半;若計劃試驗中期觀(guān)察或試驗結束做恢復期的觀(guān)察,應增加動(dòng)物數(對照和高劑量增加衛星組，每組10只，雌雄各半)。犬通常選用4個(gè)月～6個(gè)月的幼犬，一般不超過(guò)9個(gè)月，試驗開(kāi)始時(shí)每個(gè)性別動(dòng)物體重差異不應超過(guò)平均體重的±20%,每組動(dòng)物數不少于8只，雌雄各半;若計劃試驗中間尸檢或試驗結束做恢復期的觀(guān)察,應增加動(dòng)物數(對照和高劑量增加衛星組,每組4只,雌雄各半)。對照組動(dòng)物性別和數量應與受試物組相同。

5.2.2 動(dòng)輸準備

試驗前大鼠在實(shí)驗動(dòng)物房至少應進(jìn)行3d～5d(犬7d～14d)環(huán)境適應和檢疫觀(guān)察。

5.2.3 動(dòng)物飼養

實(shí)驗動(dòng)物飼養條件應符合GB14925、飲用水應符合GB5749、飼料應符合GB14924的有關(guān)規定。試驗期間動(dòng)物自由飲水和攝食,動(dòng)物推薦單籠飼養,大鼠也可按組分性別分籠群飼,每籠動(dòng)物數(一般不超過(guò)3只)應滿(mǎn)足實(shí)驗動(dòng)物*低需要的空間，以不影響動(dòng)物自由活動(dòng)和觀(guān)察動(dòng)物的體征為宜。試驗期間每組動(dòng)物非試驗因素死亡率應小于10%,瀕死動(dòng)物應盡可能進(jìn)行血液生化指標檢測、大體解剖以及病理組織學(xué)檢查，每組生物標本損失率應小于10%。