人甲基CpG結合蛋白2(MECP2) ELISA試劑盒技術(shù)提示： 1、混合蛋白溶液時(shí)，避免起泡。 2、加校準品與樣本時(shí)，每個(gè)校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應該懸臂加樣， 避免交叉污染。 3、合適的溫育時(shí)間，和充分的洗滌步驟，是保證實(shí)驗結果準確性的必要條件。 4、使用自動(dòng)洗板機時(shí)，加入一個(gè) 30 秒浸泡的步驟，可以提高檢測精度。 5、底物溶液為無(wú)色液體，保存過(guò)程中變?yōu)樗{色，代表底物溶液已經(jīng)失效，不得使用。 6、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致，加入終止液后，藍色底物產(chǎn)物，會(huì )瞬間變?yōu)辄S 色。 7、實(shí)驗中，用剩的板條，應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。 8、所有液體組分，使用前充分搖勻，嚴格按照說(shuō)明書(shū)標明的時(shí)間、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫 育操作。

上海軒澤康生物ELISA試劑盒技術(shù)指南：【關(guān)于ELISA試驗的穩定性問(wèn)題】

1. 做ELISA實(shí)驗時(shí)，結果老是重復性不上，相同的材料和相同的操作方法做出的結果就截然不同，上午做時(shí)OD在1.5，下午做時(shí)就是0.9了，所以都沒(méi)有辦法下結論，為什么會(huì )差異這么大呀？答：（1）多設平行空孔；請別人代勞，以判斷究竟是否操作問(wèn)題。（2）對于活性非常高的包被物和酶標記物，如果第、一次選擇的范圍恰好在其平臺位置邊緣。那么在重復的時(shí)候每次取樣帶來(lái)的微量誤差就很容易導致大的偏差了。特別時(shí)線(xiàn)性比較好的原料試劑，這個(gè)就很正常了。建議每次取樣的時(shí)候只使槍尖一點(diǎn)點(diǎn)位于液面下，以免吸嘴外面沾有少量抗原或者抗體或酶而使結果重復不上。

2.  酶不穩定，有何高招？答：（1）保存濃度盡量高些。（2）另外可以添加牛血清蛋白等蛋白保護劑，以避免其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解。（3）加入50%甘油-20℃保存，避免反復凍融。（4）還可以加入防腐劑防止長(cháng)菌（注意不能使用疊氮鈉，其對HRP活性有很大影響。（5）現在一些公司也有商品化的酶標保護劑供應，可以考慮一下。酶類(lèi)的穩定性與保存方法有很大的關(guān)系。干燥的制品一般比較穩定，在低溫情況下其活性可在數日甚至數年無(wú)明顯變化，貯藏要求簡(jiǎn)單，只要將干燥的樣品置于干燥器內（內裝有干燥劑）密封，保持0-4℃冰箱即可。液態(tài)穩定性較差，貯藏時(shí)應注意以下幾點(diǎn)：1.樣品不能太稀，必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏，樣品太稀易降解、變性。2.一般需加入防腐劑和穩定劑，酶常用的穩定劑有硫酸銨糊、蔗糖、甘油等，也可加入底物和輔酶以提高其穩定性。此外，鈣、鋅、硼酸等溶液對某些酶也有一定保護作用。3.貯藏溫度要求低，避免反復凍融。