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| 所在地： | 江蘇 蘇州 吳江 |
| 有效期至： | 長(cháng)期有效 |
| 發(fā)布時(shí)間： | 2023-12-17 10:06 |
| 最后更新： | 2023-12-17 10:06 |
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基因敲入小鼠
基因敲入可以在目的基因位置引入特定的突變或外源基因。比如在目的基因上引入點(diǎn)突變(模擬人類(lèi)遺傳疾病模型) ；或將報告基因(如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等)通過(guò)同源重組的方式引入目的基因的特定位點(diǎn)，從而可以通過(guò)報告基因來(lái)跟 蹤目標基因的表達。也可以用報告基因取代小鼠本身的基因，使KO/KI同時(shí)發(fā)生。
應用
1、用于藥物篩選相關(guān)研究；
2、用于信號通路的研究；
3、用于示蹤的相關(guān)研究。
基因敲入小鼠
建系原則與流程
1、去除抗性基因 Neo：選擇陽(yáng)性TurboKnockout KI小鼠與野生型小鼠雜交，獲得去除打靶載體中的 Neo 基因的雜合子F1 代小鼠；
2、再挑選一對雜合子F1 代小鼠進(jìn)行自交，通過(guò) PCR 鑒定篩選得到去除Neo的F2代純合子KI小鼠。
野生型小鼠雜交
TurboKnockout基因敲除：實(shí)現跨越“嵌合體”階段且自刪除Neo，減少兩代繁育時(shí)間
基于ES打靶技術(shù)的TurboKnockout技術(shù)采用了獨特的建系和基因改造技術(shù)，建立了具有高效遺傳優(yōu)勢的TurboKnockout ES細胞系，通過(guò)特定胚胎發(fā)育階段的顯微注射，使TurboKnockout ES細胞****代替內源ES細胞，從而實(shí)現跨越“嵌合體”階段，把ES打靶構建周期縮短至6-8個(gè)月。并且TurboKnockout采用獨特的Self-deleting Neo Cassette所獲得的TurboKnockout小鼠與任何品系小鼠交配，都可以****自刪除Neo。也就是說(shuō)，TurboKnockout不僅實(shí)現跨越“嵌合體”階段，還能真正自刪除Neo，從而快速獲得去除Neo的雜合子小鼠。